miR-422a 通过 ATG12 调控骨肉瘤细胞自噬及凋亡的研究
范锲,李文浩,丘德赞,黄孝英,何基琛,李浩曦 *
广西壮族自治区人民医院,广西 南宁,530021
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摘要:
目的 探讨 miR-422a 调控骨肉瘤细胞自噬及凋亡的作用和机制及其与靶基因 ATG12 的关系。方法 采用瞬时转染 miR-422a 模拟物和抑制物分别上调或下调骨肉瘤细胞的 miR-422a 表达水平,采用 MTT 法检测各时间点骨肉瘤细胞的增殖能力,瞬时转染 miR-422a 后采用流式细胞术检测骨肉瘤细胞凋亡情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测转染 miR-422a 对靶基因 mRNA 的影响。结果 RT-qPCR 结果显示,miR-422a 在肿瘤组织及细胞中均高表达,ATG12 在肿瘤组织及细胞中均低表达。MTT 法结果显示,miR-422a-mimic 组吸光度值明显升高,miR-422a-inhibitor 组吸光度值明显降低(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,miR-422a-inhibitor 组细胞凋亡率高于空白组与 NC 组(P<0.0001)。Western blot 检测结果显示,miR-422a-mimic 组细胞中 ATG12、LC3-II和 LC3-I蛋白量明显低于空白组与 NC 组(P<0.05);miR-422a-inhibitor 组细胞中 ATG12、LC3-II蛋白量明显高于空白组与 NC 组,LC3-I蛋白量明显低于空白组与 NC 组 (P<0.05);miR-422a-inhibitor 组细胞中 LC3-II/I明显高于空白组与 NC 组(P<0.05)。结论 miR-422a/ATG12 信号轴可能调控骨肉瘤细胞的自噬及凋亡。