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主管:陕西省卫生健康委员会
主办:西安心身医学研究所
   西安交通大学第一附属医院
国际标准刊号:ISSN2096—1413
国内统一刊号:CN61—1503/R

miR-422a 通过 ATG12 调控骨肉瘤细胞自噬及凋亡的研究

范锲,李文浩,丘德赞,黄孝英,何基琛,李浩曦 *

广西壮族自治区人民医院,广西 南宁,530021

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摘要:

目的 探讨 miR-422a 调控骨肉瘤细胞自噬及凋亡的作用和机制及其与靶基因 ATG12 的关系。方法 采用瞬时转染 miR-422a 模拟物和抑制物分别上调或下调骨肉瘤细胞的 miR-422a 表达水平,采用 MTT 法检测各时间点骨肉瘤细胞的增殖能力,瞬时转染 miR-422a 后采用流式细胞术检测骨肉瘤细胞凋亡情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测转染 miR-422a 对靶基因 mRNA 的影响。结果 RT-qPCR 结果显示,miR-422a 在肿瘤组织及细胞中均高表达,ATG12 在肿瘤组织及细胞中均低表达。MTT 法结果显示,miR-422a-mimic 组吸光度值明显升高,miR-422a-inhibitor 组吸光度值明显降低(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,miR-422a-inhibitor 组细胞凋亡率高于空白组与 NC 组(P<0.0001)。Western blot 检测结果显示,miR-422a-mimic 组细胞中 ATG12、LC3-II和 LC3-I蛋白量明显低于空白组与 NC 组(P<0.05);miR-422a-inhibitor 组细胞中 ATG12、LC3-II蛋白量明显高于空白组与 NC 组,LC3-I蛋白量明显低于空白组与 NC 组 (P<0.05);miR-422a-inhibitor 组细胞中 LC3-II/I明显高于空白组与 NC 组(P<0.05)。结论 miR-422a/ATG12 信号轴可能调控骨肉瘤细胞的自噬及凋亡。

关键词:骨肉瘤;miR-422a;自噬;ATG12;凋亡

中图分类号:R738.1文献标志码:A文章编号:2096-1413(2021)07-0010-05

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